微生物检验(2)

（3）呼吸道标本中常见的病原菌：革兰氏阳性菌：肺炎链球菌、金黄色葡萄球菌、化脓性链球菌、厌氧性球菌、结核分枝杆菌、白喉棒状杆菌、假丝酵母菌、炭疽杆菌等；革兰氏阴性菌：卡他莫拉菌、流感嗜血杆菌、脑膜炎奈瑟菌、肺炎克雷伯菌、假单胞菌属、嗜肺军团菌、百日咳鲍特菌。
（四）粪便标本微生物检验
1、一般原则：腹泻病人应在急性期采集标本，以提高检出率，最好在用药前采集。
2、标本采集：一般采集自然排出粪便、亦可用直肠拭子法采集。应挑取脓血粘液部分粪便2-3克，液状粪便应取絮状物，盛于无菌容器内立即送检。
3、评价与建议：标本一定要新鲜，否则影响条件致病菌的判断。疑为霍乱弧菌的标本用无菌棉拭子取米泔样便放入碱性胨水中保存。沙门菌感染应在感染二周后采集粪便标本。
（五）生殖道标本的微生物检验
1、一般原则：生殖道是开放器官，标本采集量应严格无菌操作以减少杂菌污染。yindao内有大量正常菌群存在，采集宫颈标本时应避免触及yindao壁。不能用棉拭子取样，应用专门的绦纶拭子。
2、标本采集
（1）尿道口分泌物：a.采集前：清洗尿道口，用灭菌纱布或棉球擦拭；b.采集时：男性：采集从尿道口溢出的脓性分泌物或用专门拭子插入尿道2-4cm旋转取出分泌物。如无分泌物可从yinjing腹面向**方向按摩促使分泌物溢出；女性：从yindao内压迫尿道，或从尿道后面向前按摩，使分泌物溢出。无肉眼可见的脓液，可用灭菌拭子轻轻深入前尿道内旋转拭子采集标本；c.采集后：置于无菌容器中2小时内送检。如疑为淋菌感染患者应床边接种巧克力平板，冬天应注意保温。
（2）yindao分泌物：a.采集时：用窥阴器扩张yindao，用绦纶拭子采集yindao口内4cm内侧壁或后穹隆处分泌物培养或涂片镜检；b.采集后：置于无菌容器中2小时内送检。如疑为淋菌感染患者应床边接种巧克力平板，冬天应注意保温。
（3）宫颈分泌物：a.采集时：用窥阴器扩张yindao，用绦纶拭子插入宫颈管约2cm采集分泌物，转动并停留10-20秒，让拭子充分吸附分泌物；c.采集后：置于无菌容器中2小时内送检。如疑为淋菌感染患者应床边接种巧克力平板，冬天应注意保温。
（4）前列腺液培养：用前列腺按摩法采集前列腺液，置于无菌容器中2小时内送检。
3、评价与建议：yindao分泌物易受yindao内共生菌的污染，如怀疑为细菌性yindao炎时，建议加做革兰氏染色，否则仅参考培养结果会误导诊断。
（六）脓液与病灶分泌物标本
1、一般原则：应严格无菌操作，做好病灶部位的消毒
2、标本采集：应先用无菌生理盐水洗净病灶表面的污染菌，对皮肤、粘膜应充分消毒，所使用的器械盛取标本的小瓶应无菌，收集后立即送检，如疑为淋菌感染患者应床边接种巧克力平板，冬天应注意保温。
（七）各种涂片检查
1、一般原则：需要快速鉴定革兰氏阴性菌、阳性菌、真菌等感染，以指导临床早期经验用药时，可在培养的同时加做涂片检查。对于胸水、腹水等其它穿刺液或分泌物由于培养出菌的概率较低可加做涂片以提高检出率。
2、标本采集：将采集标本放于无菌容器内立即送检。液体标本应大于1ml。淋球菌涂片时应向同一方向滚动，厚薄适宜。
3、评价与建议：
（1）检出革兰氏阳性菌、阴性菌或真菌、结合临床可诊断为该菌感染。
（2）结核杆菌培养时间长，故怀疑结核杆菌感染时，需取涂片检查。
（3）怀疑为隐球菌性脑膜炎，可取脑脊液做墨汁染色。
（4）怀疑霍乱弧菌感染可取粪便做悬滴试验。
（八）体外抗菌药物敏感试验
1、体外抗菌药物敏感试验是指在体外检测抗菌药物抑制细菌生长的能力。其临床应用的目的是：（1）对敏感不能预测的临床分离菌株心须常规进行药敏试验以供选择药物时参考；（2）因治疗反应差时，应进行药敏试验；（3）了解所在医院或地区常见病原菌耐药性的变迁情况，有助于临床的经验用药；（4）有助于某些菌种的鉴定。
2、根据常规剂量给药后在体内达到的血药浓度将抗菌药物的敏感性分为三级：（1）敏感：表示测试菌能被测定药物常规剂量给药后在体内达到的血药浓度所抑制或杀灭；（2）中度敏感：测试菌能被测定药物大剂量给药后在体内达到的浓度所抑制，或在测定药物浓集的部位被抑制；（3）耐药：表示测试菌不能被在体内可能达到的抗菌药物浓度所抑制。
3、当为耐甲氧西林的葡萄球菌（MRS）包括耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）耐甲氧西林表皮葡萄球菌（MRSE）感染时对头孢类和其它β-内酰胺类抗菌素可表现为体外药敏试验敏感而临床治疗无效，并通常对氨基甙类、四环素、大环内酯类、克林霉素多重耐药。
4、对葡萄球菌感染，使用喹诺酮类治疗3-4天后可使敏感菌株发展为耐药，应反复测试重复分离菌株。
4、肠球菌对复方增效磺胺、头孢菌素类、氯洁霉素、苯唑青霉素、氨基糖甙类天然耐药，可在体外试验中表现为敏感。应注意耐万古霉素的肠球菌感染。
5、肠杆菌属、枸橼酸杆菌属、沙雷菌属在三代头孢治疗的过程3-4日内可能被选择出对β-内酰胺多重耐药的菌株，因此须反复测试重复分离菌株。
6、对于分离出的肺炎克雷伯菌与大肠埃希菌，若对某些超广谱头孢菌素或氨曲南耐药时，应怀疑该菌产超广谱β-内酰胺酶（ESBL）。